Latrophilin-2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403945-LAC

ADGRL2 kodiert Latrophilin-2, einen Adhäsions-GPCR, der durch eine große extrazelluläre Domäne gekennzeichnet ist, die Zell-Zell-Interaktionen vermittelt und extrazelluläre Signale in intrazelluläre Signalwege übersetzt. Latrophilin-2 ist an kontaktabhängiger Kommunikation beteiligt, koppelt an heterotrimere G‑Proteine und beeinflusst cAMP- und Ca2+-abhängige Signalübertragung, Zytoskelett-Remodeling sowie synapsenbezogene Prozesse. Über Interaktionen mit synaptischen Adhäsionspartnern und Komponenten der extrazellulären Matrix kann es die neuronale Konnektivität und den Aufbau neuronaler Schaltkreise modulieren. Fehlregulierte Adhäsions-GPCR-Signalgebung und eine veränderte synaptische Organisation wurden mit neurodevelopmentalen und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was ADGRL2 als Ziel für mechanistische Studien zu Signalgebung und Konnektivität unterstützt.

Latrophilin-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ADGRL2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Latrophilin-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ADGRL2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Latrophilin-2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ADGRL2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.