LARP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404097-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LARP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LARP1 Double Nickase Plasmid (h) e il LARP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LARP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LARP1 Antibody (A-8): sc-515873
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LARP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404097-NIC | 20 µg | $410.00 |
LARP1 (La-related protein 1) è una proteina legante l’RNA che collega il destino degli mRNA ai segnali di nutrienti e di crescita, con ruoli rilevanti nel controllo della traduzione e nella stabilità degli mRNA. Interagisce con la via mTORC1 e regola la traduzione degli mRNA TOP che codificano proteine ribosomiali e fattori di traduzione, collegando la biogenesi dei ribosomi alla proliferazione cellulare e alle risposte allo stress. Attraverso la modulazione della traduzione cap-dipendente, LARP1 contribuisce alla progressione del ciclo cellulare e a programmi adattativi come l’autofagia e il rimodellamento metabolico. Un’espressione di LARP1 deregolata o un contesto di segnalazione alterato è stato associato a fenotipi proliferativi e a paesaggi traslazionali modificati in diversi modelli di malattia, a supporto del suo impiego come nodo per lo studio del controllo della crescita.
LARP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LARP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LARP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LARP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LARP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.