Lamin B receptor Double Nickaseプラスミド (m): sc-430209-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Lamin B receptor Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Lamin B receptorダブルニカースプラスミド（m）およびLamin B receptorダブルニカースプラスミド（m2）は、Lbrを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Lamin B receptor Double Nickaseプラスミド (m) | sc-430209-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Lamin B receptor Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-430209-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスのLbrはラミンB受容体をコードしており、ラミンB受容体は核内膜の内膜側に存在する膜貫通タンパク質で、B型ラミンおよびクロマチン関連因子と結合して、核膜の構造と高次ゲノム構築を支えます。ラミンB受容体は、核周辺部でのヘテロクロマチンの係留に寄与し、核ラミナの動態をDNA複製タイミング、転写制御、有糸分裂後の核膜再構築と結び付けます。これらの役割を通じて、Lbrは核形態、クロマチン区画化、系統特異的な遺伝子発現プログラムを制御する経路と密接に関連しています。ラミン–クロマチン相互作用の攪乱は、核膜病（nuclear envelopathies）の研究や、核形態およびゲノム制御の変化に伴う発生表現型の研究に広く重要です。
Lamin B receptor ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Lbr 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Lbr内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Lbrの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Lbrが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。