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L-type Ca++ CP α1D双切口酶质粒(h) | sc-401745-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-type Ca++ CP α1D双切口酶质粒(h2) | sc-401745-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1D 编码 L 型电压门控钙通道(CaV1.3)的 α1D 成孔亚基,该通道介导由膜去极化触发的 Ca2+ 内流,并塑造兴奋—转录偶联。依赖 CaV1.3 的钙进入通过 Ca2+/钙调蛋白信号及其下游通路(如 CaMK 和钙调神经磷酸酶/ NFAT)调控神经元放电模式、激素分泌以及活动依赖性的基因表达。在兴奋性组织中,CACNA1D 参与起搏活动以及钙依赖性的突触和转录可塑性。CACNA1D 的失调或遗传变异与神经发育和神经精神表型,以及内分泌与心血管生理相关,支持其在离子通道生物学与疾病机制研究中的重要性。
L-type Ca++ CP α1D 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CACNA1D 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CACNA1D内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CACNA1D的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CACNA1D基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。