Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Ku86 Antibody (Ku15): sc-33653. Western blot analysis of Ku86 expression in HeLa (A), K-562 (B) and HCT-116 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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Ku-86双切口酶质粒(h): sc-400549-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Ku-86 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Ku-86双切酶质粒（h）和Ku-86双切酶质粒（h2）编码针对XRCC5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Ku86: sc-5280，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Ku-86双切口酶质粒(h) | sc-400549-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ku-86双切口酶质粒(h2) | sc-400549-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XRCC5 编码 Ku-86（Ku80），它是 Ku 异源二聚体的核心亚基之一。该二聚体能够识别 DNA 双链断裂（DSB）并启动经典非同源末端连接（c-NHEJ）。Ku-86 通过结合断裂的 DNA 末端并招募 DNA-PKcs 形成 DNA-PK 复合体，协调断端加工与连接，从而在复制压力和基因毒性损伤之后维持基因组完整性。Ku-86 的功能还与 V(D)J 重排、类别转换重组、端粒维持以及 DNA 损伤信号检查点相互交织。XRCC5 依赖性修复的失调与基因组不稳定表型及对 DNA 损伤剂敏感性改变有关，因此它常被用于癌症生物学、免疫学以及与衰老相关的基因组维护研究。
Ku-86 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 XRCC5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对XRCC5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏XRCC5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了XRCC5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。