Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ku-70 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400378-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ku-70O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ku-70 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ku-70 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para XRCC6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ku70 Anticorpo (E-5): sc-17789
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ku-70 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ku-70 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XRCC6 codifica a subunidade Ku-70 do heterodímero Ku, um sensor central de quebras de dupla fita no DNA que se liga às extremidades do DNA e recruta a DNA-PKcs para iniciar a via clássica de junção de extremidades não homólogas (c-NHEJ). A Ku-70 participa da recombinação V(D)J, da proteção dos telômeros e das respostas ao estresse replicativo, ajudando a manter a estabilidade do genoma durante a resposta a danos no DNA. A interrupção da função de Ku altera a escolha de via entre NHEJ e recombinação homóloga e pode aumentar translocações cromossômicas e a radiossensibilidade. A atividade ou expressão desregulada de XRCC6 tem sido associada a fenótipos de instabilidade genômica observados em múltiplos contextos de câncer e a alterações no desenvolvimento do sistema imune devido a defeitos na junção de extremidades.
Ku-70 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus XRCC6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de XRCC6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função XRCC6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com XRCC6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.