KLF15 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402267-LAC

KLF15（Krüppel-like factor 15）は、GCリッチなプロモーター配列に結合するジンクフィンガー型転写因子をコードしており、細胞分化、代謝恒常性、ストレス応答性転写を制御する文脈依存的な遺伝子プログラムを協調的に調節します。ヒト組織では、KLF15がホルモンおよび栄養シグナルを統合して、糖新生の調節、脂質利用、ミトコンドリアのエネルギーバランスに関わる経路を制御し、さらに骨格筋や心筋における転写リモデリングにも寄与します。KLF15の発現異常は、代謝表現型の変化や、心血管および骨格筋における不適応な組織応答と関連することが示されており、エネルギー代謝と細胞状態遷移の転写制御を研究するうえで有用な結節点となります。下流標的が広範な転写調節因子であることから、KLF15は環境シグナルとエピジェネティクスおよびプロモーター制御レベルの出力を結びつける遺伝子ネットワークを明らかにする目的で、しばしば解析対象とされています。

KLF15 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なKLF15の発現上昇を可能にします。

KLF15 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、KLF15転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性KLF15の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のKLF15ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。