KIF14 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-408805

Panoramica

KIF14 codifica un motore dei microtubuli della famiglia chinesina-3 che si localizza al fuso mitotico e al corpo intermedio (midbody) per coordinare la segregazione dei cromosomi e la citochinesi. Supporta la progressione del ciclo cellulare regolando la dinamica del fuso, l’organizzazione del fuso centrale e il completamento dell’abscissione, collegando il trasporto basato sui microtubuli agli eventi tardivi della mitosi. Un’espressione o un’attività aberrante di KIF14 è spesso associata, in ambito oncologico, a un’alterata capacità proliferativa, aneuploidia e instabilità genomica. Di conseguenza, KIF14 è comunemente studiato in vie che governano la fedeltà mitotica, il rimodellamento del citoscheletro e programmi trascrizionali associati alla proliferazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO KIF14 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene KIF14 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del KIF14 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto KIF14 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina KIF14.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di KIF14 per lo studio della segnalazione di KIF14, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni KIF14 critici per la funzione di KIF14
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di KIF14 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal KIF14 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal KIF14 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus KIF14. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal KIF14 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR KIF14 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia KIF14 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio KIF14 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.