JNK1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (bovine): sc-437283

Panoramica

JNK1 (MAPK8) è una chinasi proteica attivata dallo stress appartenente alla famiglia delle MAP chinasi (mitogen-activated protein kinase), che integra segnali a monte provenienti da citochine, fattori di crescita, specie reattive dell’ossigeno e danno al DNA per regolare programmi trascrizionali attraverso bersagli quali c-Jun e altri componenti di AP-1. Nelle cellule bovine, JNK1 contribuisce al controllo dell’apoptosi, della segnalazione infiammatoria e della differenziazione coordinando cascate MAPK che intersecano NF-κB, la segnalazione insulinica e risposte associate a TGF-β. L’attività di JNK1 influenza esiti cellulari tra cui proliferazione, migrazione e rimodellamento della matrice extracellulare, rendendola rilevante in modelli di stress tissutale, disregolazione metabolica e attivazione immunitaria. Una segnalazione JNK alterata è stata associata in senso ampio a patologie infiammatorie e degenerative, a supporto della sua utilità come nodo meccanicistico nella ricerca focalizzata sulle vie di segnalazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO JNK1 (bovine) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari bovine. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina JNK1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di JNK1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di JNK1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal JNK1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine) e dal JNK1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal JNK1 Plasmide HDR (bovine) e il plasmide HDR JNK1 (bovine2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.