JMJD3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432132-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JMJD3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase JMJD3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase JMJD3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Kdm6b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JMJD3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432132-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JMJD3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-432132-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Kdm6b de camundongo codifica a JMJD3 (KDM6B), uma desmetilase de histonas contendo o domínio Jumonji C que remove marcas repressoras de H3K27me3 para promover a ativação transcricional. A JMJD3 coordena o remodelamento da cromatina durante o comprometimento de linhagem e a sinalização inflamatória, influenciando programas a jusante de vias como a NF-κB e redes transcricionais do desenvolvimento. Ao regular a acessibilidade de enhancers e promotores, ela contribui para a polarização de macrófagos, a diferenciação neural e esquelética e a expressão gênica associada à senescência celular. A atividade desregulada de Kdm6b/JMJD3 tem sido associada a estados epigenéticos alterados observados na biologia do câncer, em processos de neurodesenvolvimento e em modelos de doenças mediadas pelo sistema imune.
JMJD3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Kdm6b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Kdm6b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Kdm6b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Kdm6b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.