Plásmido Doble Nickase (h) JAZF1: sc-404839-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)JAZF1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa JAZF1 (h) y el plásmido de doble nickasa JAZF1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a JAZF1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: JAZF1 Anticuerpo (C-11): sc-376503
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) JAZF1 | sc-404839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) JAZF1 | sc-404839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JAZF1 (yuxtapuesto con otro proteína de dedos de zinc 1) codifica un regulador transcripcional con dedos de zinc implicado en el control de programas de expresión génica vinculados al metabolismo y la diferenciación celular. Se ha asociado con la señalización de receptores nucleares y con redes de co-reguladores transcripcionales que moldean la biología de los adipocitos y de los islotes pancreáticos. La variación genética en JAZF1 se relaciona con la susceptibilidad a la diabetes tipo 2 y con rasgos metabólicos afines, lo que respalda su relevancia para estudios de la homeostasis de la glucosa y la función endocrina. JAZF1 también se ha investigado en el contexto de la biología del cáncer y de reordenamientos cromosómicos, por lo que resulta útil para estudiar mecanismos de desregulación transcripcional en modelos relevantes de enfermedad.
JAZF1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus JAZF1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de JAZF1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de JAZF1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con JAZF1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.