Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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JAM-A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400687-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JAM-AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase JAM-A (h) e o Plasmídeo Double Nickase JAM-A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para F11R. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:JAM-A Anticorpo (J10.4): sc-53623
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JAM-A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400687-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAM-A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400687-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
F11R codifica a molécula de adesão juncional A (JAM-A), um recetor da superfamília das imunoglobulinas concentrado nas junções apertadas (tight junctions), onde regula a integridade das barreiras epitelial e endotelial. A JAM-A participa na adesão célula–célula, no estabelecimento da polaridade e na sinalização dependente de contacto, e modula a transmigração de leucócitos por meio de interações com integrinas e proteínas de ancoragem (scaffolding). Ao acoplar-se a complexos juncionais e a vias de pequenas GTPases, a JAM-A influencia a organização do citoesqueleto e a permeabilidade paracelular. A expressão ou a localização desregulada de JAM-A tem sido associada a disfunção inflamatória da barreira e a fenótipos alterados de migração celular relevantes para a biologia do cancro e para a patologia vascular.
JAM-A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus F11R em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de F11R. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função F11R. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com F11R interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.