Integrin αX/ITGAX/CD11cCRISPR激活质粒(h): sc-401765-ACT

ITGAX 编码整合素 αX（CD11c），它作为 α 亚基与整合素 β2（CD18）形成异二聚体，构成补体受体 4（CR4），这是髓系谱系细胞表面关键的黏附与吞噬受体。CD11c 介导细胞-细胞与细胞-基质相互作用、白细胞迁移运输，以及对被 iC3b 调理包被靶标的补体依赖性识别；同时整合来自整合素“由内向外”（inside-out）信号的线索，调控细胞骨架重塑与免疫突触形成。通过与 Fc 受体信号及其下游激酶网络的协同串话，ITGAX 影响抗原摄取、树突状细胞成熟以及炎性细胞因子程序。ITGAX 表达失衡或 CD11c⁺ 细胞丰度的变化，常用于在肿瘤、自身免疫性炎症与慢性感染等情境中对免疫浸润与髓系激活状态进行分层评估，从而支持对髓系驱动疾病生物学机制的研究。

Integrin αX/ITGAX/CD11c CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGAX的表达。

Integrin αX/ITGAX/CD11c CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGAX基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGAX转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin αX/ITGAX/CD11c表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGAX位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin αX/ITGAX/CD11c的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGAX表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin αX/ITGAX/CD11c通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。