Integrin αX/ITGAX/CD11c CRISPR Activationプラスミド (h): sc-401765-ACT

ITGAXはインテグリンαX（CD11c）をコードしており、これはインテグリンβ2（CD18）とヘテロ二量体を形成して補体受容体4（CR4）となるαサブユニットである。CR4は骨髄系細胞における主要な接着・貪食受容体の一つである。CD11cは細胞—細胞および細胞—マトリックス間相互作用、白血球のトラフィッキング、ならびにiC3bでオプソニン化された標的の補体依存的認識を担い、インテグリンのインサイドアウトシグナルからの情報を統合して、細胞骨格の再編成や免疫シナプス形成を調節する。Fc受容体シグナルおよび下流のキナーゼネットワークとの協調的なクロストークを介して、ITGAXは抗原取り込み、樹状細胞の成熟、炎症性サイトカインプログラムに影響を与える。ITGAX発現の異常やCD11c陽性細胞量は、がん、自己免疫性炎症、慢性感染といった状況における免疫浸潤や骨髄系活性化状態の層別化にしばしば用いられており、骨髄系細胞が駆動する疾患生物学の機序研究を支えている。

Integrin αX/ITGAX/CD11c CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性ITGAXの発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

Integrin αX/ITGAX/CD11c CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における ITGAX 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はITGAX転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性Integrin αX/ITGAX/CD11cの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のITGAX遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるIntegrin αX/ITGAX/CD11c依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびITGAX発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるIntegrin αX/ITGAX/CD11c経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。