Integrin αV/ITGAV/CD51 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400506-NIC

ITGAVはインテグリンαV（CD51）をコードしており、αVは複数のβインテグリン（例：β3、β5、β6、β8）と二量体を形成して、ビトロネクチン、フィブロネクチン、オステオポンチンなどのRGDモチーフを含む細胞外マトリックス（ECM）リガンドに対する受容体として機能します。接着依存的なアウトサイドインシグナル伝達を介して、αV含有インテグリンはFAK/SRC、PI3K–AKT、MAPK/ERKなどの経路により、フォーカルアドヒージョンの動態、細胞骨格の再構築、細胞移動を制御します。ITGAVはメカノトランスダクションにも関与し、特定のヘテロ二量体を通じて細胞外微小環境におけるTGF-βの活性化を調節し得ることで、上皮間葉転換（EMT）プログラムや組織リモデリングに影響を与えます。αVインテグリンシグナルの破綻は、腫瘍細胞の浸潤、血管新生、線維化、炎症細胞の遊走といった文脈で頻繁に研究されており、そのためITGAVは接着および微小環境シグナル伝達研究における一般的な標的となっています。

Integrin αV/ITGAV/CD51 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ITGAV 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ITGAV内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ITGAVの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ITGAVが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。