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Integrin β2/ITGB2/CD18双切口酶质粒(h) | sc-400921-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β2/ITGB2/CD18双切口酶质粒(h2) | sc-400921-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB2 编码整合素 β2(CD18),这是一种仅在白细胞中表达的黏附受体亚基,可与 α 链(如 ITGAL/CD11a、ITGAM/CD11b、ITGAX/CD11c)配对形成 β2 整合素,从而调控免疫细胞的迁移运输及效应功能。这些异源二聚体通过与细胞骨架重塑、黏着斑动力学以及 MAPK/PI3K 相关通路相联系的“由外向内”和“由内向外”信号传导,调节对白细胞与内皮的牢固黏附、跨内皮迁移以及免疫突触的形成。依赖 CD18 的与 ICAM 家族配体的相互作用,在炎症过程中协调中性粒细胞和淋巴细胞的募集,并影响吞噬作用与氧爆发程序。ITGB2 的遗传或功能性扰动与白细胞黏附缺陷及炎症反应改变相关,因此它是研究宿主防御与免疫失调机制的重要靶点。
Integrin β2/ITGB2/CD18 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITGB2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITGB2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITGB2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITGB2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。