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Integrin α1/ITGA1/CD49aCRISPR激活质粒(h) | sc-401275-ACT | 20 µg | $397.00 |
ITGA1 编码整合素 α1(CD49a),这是一种 α 亚基,与整合素 β1 配对形成 α1β1 胶原/层粘连蛋白受体,从而介导细胞与细胞外基质(ECM)的黏附。该受体调控黏着斑信号传导、细胞骨架重塑,以及 FAK/Src、MAPK/ERK 和 PI3K-AKT 等下游通路,进而影响细胞迁移、生存与分化。ITGA1 的活性参与 ECM 感知、力学信号转导和组织重塑,作用于基质细胞与免疫相关环境,尤其是在富含胶原的微环境中。在多种与疾病相关的模型里,当 ECM 组成与黏附信号发生改变时,整合素 α1 信号失调与纤维化重塑、炎症细胞转运以及肿瘤细胞侵袭等过程相关。
Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGA1的表达。
Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的ITGA1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于ITGA1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Integrin α1/ITGA1/CD49a表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的ITGA1位点,并能够研究内源性位点上依赖于Integrin α1/ITGA1/CD49a的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGA1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin α1/ITGA1/CD49a通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。