INSR/Insulin Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400075-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- INSR/Insulin ReceptorO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase INSR/Insulin Receptor (h) e o Plasmídeo Double Nickase INSR/Insulin Receptor (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para INSR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:INSR/Insulin Receptor β Anticorpo (CT-3): sc-57342
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
INSR/Insulin Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400075-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
INSR/Insulin Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400075-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INSR codifica o receptor humano de insulina, uma tirosina-quinase receptora que inicia a sinalização dependente de insulina para regular a captação de glicose, o metabolismo de glicogênio e lipídios e o crescimento celular. Após a ligação do ligante e a autofosforilação, o INSR recruta proteínas adaptadoras como IRS1/2 para ativar as vias PI3K–AKT–mTOR e RAS–RAF–MEK–ERK, coordenando programas metabólicos e mitogênicos. A função do INSR influencia o tráfego vesicular do GLUT4 e um controle mais amplo da detecção de nutrientes e da sinalização anabólica. A desregulação da sinalização do INSR está implicada na resistência à insulina e em doenças metabólicas e também é explorada por muitos tipos de tumor para sustentar fenótipos de proliferação e sobrevivência.
INSR/Insulin Receptor O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus INSR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de INSR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função INSR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com INSR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.