IMMP1L Double Nickaseプラスミド (h): sc-414955-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IMMP1L Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IMMP1Lダブルニカースプラスミド（h）およびIMMP1Lダブルニカースプラスミド（h2）は、IMMP1Lを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IMMP1L Double Nickaseプラスミド (h) | sc-414955-NIC | 20 µg | $410.00 |
IMMP1Lは、内ミトコンドリア膜ペプチダーゼのサブユニットをコードしており、ミトコンドリア内に輸送されたタンパク質が内膜へ移行した後、シグナルペプチドを切断・処理することでその成熟に関与します。ミトコンドリアタンパク質の品質管理と酸化的リン酸化能を支えることで、IMMP1Lは生体エネルギー恒常性の維持に寄与し、ミトコンドリア機能不全に関連する二次的なストレス応答（活性酸素種の取り扱いの変化やマイトファジー動態の変化など）を抑制します。遺伝学的・機能的研究により、IMMP1Lの変異（多型）が神経発達および神経精神医学的表現型と関連することが示されており、これは神経細胞がミトコンドリアのプロテオスタシスの乱れに高い感受性を示すことと整合的です。したがってIMMP1Lは、ミトコンドリアにおけるプロセシング経路の機構研究や、内膜プロテアーゼ活性が細胞代謝およびストレス適応をどのように形作るかを理解する上で重要な対象です。
IMMP1L ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IMMP1L 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IMMP1L内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IMMP1Lの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IMMP1Lが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。