Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-2Rγ Double Nickaseプラスミド (h): sc-401876-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IL-2Rγ Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IL-2Rγダブルニカースプラスミド（h）およびIL-2Rγダブルニカースプラスミド（h2）は、IL2RGを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IL-2Rγ 抗体 (A-10): sc-271060
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IL-2Rγ Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-2Rγ Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RG は共通γ鎖（IL-2Rγ、CD132）をコードしており、IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15、IL-21 など複数のサイトカイン受容体で共有される、必須のシグナル伝達サブユニットである。サイトカインが結合すると、IL-2Rγ は受容体複合体を JAK3 および下流の STAT シグナルへと連結し、T 細胞・B 細胞・NK 細胞にまたがるリンパ球の発生、生存、エフェクター分化を統合的に制御する。この経路は、サイトカイン駆動の増殖・分化や恒常性維持といった、より広範な免疫制御プログラムとも連動している。IL2RG 依存的なシグナル伝達の破綻は、獲得免疫および自然免疫の免疫細胞機能における重篤な欠陥と強く関連しており、IL2RG は免疫不全の機序解明やサイトカイン受容体シグナルの研究における重要な遺伝子である。
IL-2Rγ ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IL2RG 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IL2RG内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IL2RGの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IL2RGが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。