IL-23 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-401374-LAC-2

Das humane Gen IL23A kodiert die p19‑Untereinheit von Interleukin‑23 (IL‑23), einem heterodimeren Zytokin, das sich mit IL12B (p40) zum IL‑23‑Komplex zusammenschließt, der über den IL‑23‑Rezeptor signalisiert und in T‑Zellen sowie angeborenen lymphoiden Populationen JAK/STAT‑Signalwege, insbesondere STAT3, aktiviert. IL‑23 ist ein zentraler Regulator der Typ‑17‑Immunität, unterstützt die Differenzierung und Aufrechterhaltung von Th17‑Zellen und fördert nachgeschaltete Effektorprogramme, die die mukosale Barriereabwehr und entzündliche Zytokinnetzwerke prägen. Eine fehlregulierte IL23A/IL‑23‑Signalübertragung wurde mit chronischen immunvermittelten Entzündungen in Verbindung gebracht, darunter Psoriasis, entzündliche Darmerkrankungen und Spondyloarthritis, wodurch diese Achse mit pathogener Gewebeentzündung und -remodellierung verknüpft ist. IL23A‑gerichtete Geneditierung und funktionelle Perturbationswerkzeuge werden häufig eingesetzt, um die Zytokinassemblierung, die Signalübertragung in antigenpräsentierenden Zellen und die Dynamik der IL‑23/Th17‑Schaltkreise in Zellmodellen und in vivo‑immunologischen Studien zu untersuchen.

IL-23 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente IL23A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IL-23 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der IL23A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IL-23-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen IL23A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.