Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) IL-1RI: sc-421098-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IL-1RI consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IL-1RI (m) y el plásmido de doble nickasa IL-1RI (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Il1r1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-1RI Anticuerpo (H-8): sc-393998
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IL-1RI | sc-421098-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IL-1RI | sc-421098-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il1r1 codifica el IL-1RI de ratón, el principal receptor de señalización para la interleucina‑1α y la interleucina‑1β que inicia la activación de la inmunidad innata en la superficie celular. La unión del ligando recluta la proteína accesoria del receptor de IL‑1 y MyD88 para formar un complejo de señalización que impulsa las cascadas IRAK–TRAF6, culminando en la activación de NF‑κB y MAPK y en la amplia inducción de programas génicos inflamatorios. A través de estas vías, IL‑1RI regula la producción de citocinas y quimiocinas, el reclutamiento de leucocitos, las respuestas febriles y la remodelación tisular en numerosos tipos celulares. La señalización desregulada de IL‑1RI se ha implicado en modelos de autoinflamación, patología articular tipo artritis, neuroinflamación e inflamación metabólica, lo que convierte a Il1r1 en un nodo clave para la investigación mecanística en inmunología.
IL-1RI El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Il1r1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Il1r1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Il1r1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Il1r1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.