Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
IL-1RI Plasmide Double Nickase (h): sc-401144-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-1RI Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-1RI Double Nickase Plasmid (h) e il IL-1RI Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL1R1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-1RI Antibody (H-8): sc-393998
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-1RI Plasmide Double Nickase (h) | sc-401144-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1RI Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401144-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL1R1 umano codifica il recettore dell’interleuchina-1 di tipo I (IL‑1RI), un recettore transmembrana che lega IL‑1α e IL‑1β e si associa a IL1RAP per avviare la segnalazione MyD88–IRAK–TRAF6. Questa via attiva le cascate di NF‑κB e MAPK per regolare la produzione di citochine, il reclutamento dei leucociti, le risposte associate all’inflammasoma e i programmi di sopravvivenza cellulare. La segnalazione dipendente da IL‑1RI modella il dialogo tra immunità innata e adattativa e modula il rimodellamento tissutale durante processi infiammatori acuti e cronici. Un’attività di IL1R1 deregolata è stata associata a fenotipi infiammatori e autoimmuni, infiammazione metabolica, patologie cardiovascolari, neuroinfiammazione e segnalazione del microambiente con effetti pro-tumorali, rendendolo un bersaglio comune negli studi meccanicistici delle reti citochiniche.
IL-1RI Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL1R1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL1R1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL1R1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL1R1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.