IL-17RB CRISPR Activationプラスミド (h): sc-404114-ACT

IL17RBはインターロイキン17受容体B（IL-17RB）をコードしており、IL-17RBはI型の膜貫通型サイトカイン受容体で、IL17RAと協調してIL-17ファミリーリガンド、とりわけIL-25（IL-17E）からのシグナルを伝達します。受容体がリガンドと結合すると、ACT1などのアダプタータンパク質がリクルートされ、NF-κBおよびMAPKのシグナル伝達プログラムが活性化されます。これにより、上皮細胞や間質細胞での感知がケモカイン産生、粘膜炎症、ならびに2型免疫への偏りと結び付けられます。IL-17RBの活性は、気道やバリア組織、骨髄系細胞、リンパ系サブセット間のクロストークに影響し、アレルゲンや蠕虫に対する応答に加えて、より広範な炎症性リモデリングを形作ります。IL17RBの発現やシグナル伝達の破綻は、慢性炎症状態や腫瘍関連免疫微小環境の変化と関連づけられており、免疫シグナル伝達や細胞間コミュニケーションの機序研究において重要です。

IL-17RB CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性IL17RBの発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

IL-17RB CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における IL17RB 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はIL17RB転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性IL-17RBの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のIL17RB遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるIL-17RB依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびIL17RB発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるIL-17RB経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。