IL-10 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421076-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-10O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-10 (m) e o Plasmídeo Double Nickase IL-10 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Il10. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-10 Anticorpo (A-2): sc-365858
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-10 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421076-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Il10 de camundongo codifica a interleucina-10 (IL-10), uma citocina imunorregulatória produzida por múltiplos subtipos de leucócitos que limita programas inflamatórios inatos e adaptativos. A IL-10 sinaliza por meio do complexo receptor de IL-10 para ativar respostas transcricionais de STAT3 dependentes de JAK1/TYK2, atenuando a produção de citocinas induzida por NF-κB, a apresentação de antígenos e vias coestimuladoras. Esse eixo molda a polarização de macrófagos e células dendríticas, restringe a atividade efetora de Th1/Th17 e sustenta a homeostase tecidual em barreiras mucosas. A sinalização desregulada de IL-10 está associada a respostas inflamatórias aberrantes e a suscetibilidade alterada a patologias mediadas pelo sistema imune, tornando Il10 um nó-chave para estudar o controle de feedback de citocinas em modelos relevantes para doenças.
IL-10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Il10 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Il10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Il10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Il10 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.