IKK alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400492-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IKK alphaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IKK alpha (h) e o Plasmídeo Double Nickase IKK alpha (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHUK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IKK alpha Anticorpo (B-8): sc-7606
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IKK alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400492-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IKK alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400492-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHUK codifica a IKK alfa (IKKα), uma subunidade catalítica do complexo IκB quinase que regula a sinalização de NF-κB por meio do controle, dependente de fosforilação, da estabilidade de IκB e dos programas transcricionais a jusante. Além da ativação canônica de NF-κB, a IKKα desempenha um papel de destaque na sinalização não canônica de NF-κB por meio do processamento de NF-κB2 p100 em p52, influenciando a organogênese linfoide, a maturação de células B e a expressão de genes inflamatórios. A IKKα também se conecta a vias que governam a sobrevivência celular, a diferenciação e as respostas ao estresse, vinculando a atividade de CHUK à regulação dependente do contexto da proliferação e da apoptose. A atividade desregulada do eixo IKKα/NF-κB é frequentemente estudada na biologia tumoral associada à inflamação, na desregulação imune e nos mecanismos de doenças inflamatórias crônicas.
IKK alpha O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHUK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHUK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHUK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHUK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.