Ikaros Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400530-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IkarosO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ikaros (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ikaros (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IKZF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ikaros Anticorpo (E-2): sc-398265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ikaros Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400530-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ikaros Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400530-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O IKZF1 codifica Ikaros, um fator de transcrição com dedos de zinco que coordena a especificação de linhagens hematopoéticas e a diferenciação de células imunes ao regular a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais. Ikaros integra sinais para controlar redes gênicas envolvidas no desenvolvimento linfoide, na competência de sinalização do receptor de célula B, na transcrição responsiva a citocinas e em checkpoints do ciclo celular. Por meio do recrutamento de complexos de remodelamento de cromatina e de modificação de histonas, ele influencia a atividade de enhancers e promotores ao longo de diferentes estágios do desenvolvimento. A desregulação da transcrição dependente de IKZF1 está associada a alterações na maturação de linfócitos e é frequentemente estudada no contexto de mecanismos de doenças hematológicas e de reprogramação transcricional leucemogênica.
Ikaros O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IKZF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IKZF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IKZF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IKZF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.