Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGFBP7 Double Nickaseプラスミド (h): sc-418272-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IGFBP7 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IGFBP7ダブルニカースプラスミド（h）およびIGFBP7ダブルニカースプラスミド（h2）は、IGFBP7を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IGFBP7 抗体 (H-3): sc-365293
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IGFBP7 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-418272-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP7 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-418272-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP7（インスリン様成長因子結合タンパク質7）は分泌型の糖タンパク質で、リガンドの利用可能性や受容体への結合を調節することでIGF／インスリンシグナル伝達を制御し、細胞の増殖、接着、ならびに老化関連プログラムに影響を与えます。細胞外マトリックスとの相互作用やストレス応答性シグナル伝達にも関与し、内皮細胞の生物学、組織リモデリング、炎症性微小環境を形作る経路群と交差します。IGFBP7の発現変化は、線維化、血管機能障害、がん関連の間質リモデリングなど多様な状況で報告されており、増殖や細胞—マトリックス動態に影響し得ます。そのためIGFBP7は、増殖因子シグナル伝達と細胞外での制御、そして細胞状態の転換を結び付ける結節点として、しばしば研究されています。
IGFBP7 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IGFBP7 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IGFBP7内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IGFBP7の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IGFBP7が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。