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IGFBP4双切口酶质粒(h) | sc-402342-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP4双切口酶质粒(h2) | sc-402342-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)是一种分泌型调节因子,可调控IGF‑I和IGF‑II的生物可利用性,从而影响其与受体的结合以及下游PI3K–AKT和MAPK信号通路,进而塑造细胞增殖、生存与分化等程序。通过在细胞外环境中结合IGF,IGFBP4能够微调生长因子梯度,并在组织重塑情境下(包括血管与基质微环境)调控旁分泌/自分泌反应。IGFBP4的表达或加工过程发生改变,已与纤维化、代谢功能障碍、心血管重塑以及多种与癌症相关的异常生长信号表型有关。因此,IGFBP4常被作为一种具有情境依赖性的调控因子,用于研究IGF轴活性及细胞外信号动态。
IGFBP4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IGFBP4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IGFBP4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IGFBP4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IGFBP4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。