IGFBP4 CRISPR Activationプラスミド (m): sc-421065-ACT
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IGFBP4 CRISPR Activationプラスミド (m)は、特異的に遺伝子の発現量を増加させるため、相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムです。
- IGFBP4 CRISPR Activationプラスミド (m)は、1:1:1の質量比で以下の3つのプラスミドがら成る：トランス活性化ドメインVP64に溶解する非活性化されたCas9 (dCas9)ヌクレアーゼ(D10A と H840A)をコード化したのプラスミド（ブラストサイジン耐性遺伝子を含めて）、MS2-p65-HSF1融合蛋白質をコード化したのプラスミド（ハイグロマイシン耐性遺伝子を含めて）、2つのMS2 RNAアプタマーに溶解する目標特異的な20ntガイドRNAをコード化したのプラスミド（ピューロマイシン耐性遺伝子を含めて）。
- 得られたSAM複合体は、部位特異的な約200-250nt転写開始点の上流の領域に結合し、転写因子の強いリクルートメントを提供し、遺伝子の高い活性化効果が得られます。
- IGFBP4 CRISPR活性化プラスミド（m）およびIGFBP4 CRISPR活性化プラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igfbp4転写開始点の上流にある異なる調節領域を標的としています。いずれか一方、または両方のデザインが利用可能である可能性があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IGFBP4 CRISPR Activationプラスミド (m) | sc-421065-ACT | 20 µg | $397.00 |
マウスIgfbp4は、インスリン様成長因子結合タンパク質4（IGFBP4）をコードしており、分泌型のIGF生物学的利用能の調節因子として、IGF1/IGF2シグナルを制御し、PI3K–AKTおよびMAPK経路の活性に影響を与えます。IGFBP4はIGFに結合して受容体への関与の仕方を調整することで、さまざまな生理的状況における細胞増殖、生存、分化、ならびに組織リモデリングの制御に寄与します。またIGFBP4は、細胞外マトリックス（ECM）関連プロセスや、プロテアーゼ感受性の調節機構と関連づけられており、局所的なIGFシグナルの動態を微調整し得ることが示されています。IGFBP4を介したIGF軸制御の破綻は、マウスモデルにおける発生生物学、線維化と創傷修復、代謝表現型、腫瘍微小環境シグナリングの研究において重要なテーマです。
IGFBP4 CRISPR活性化プラスミド（m）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性Igfbp4の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。
IGFBP4 CRISPR 活性化プラスミド (m) は、ヒト細胞株における Igfbp4 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。
標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はIgfbp4転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性IGFBP4の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のIgfbp4遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるIGFBP4依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびIgfbp4発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるIGFBP4経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。