Particules Lentivirales d'Activation (m) IGF-1 Receptor α/β/IGF1R: sc-421057-LAC

Igf1r chez la souris code le récepteur de l’IGF‑1 α/β (IGF1R), une tyrosine kinase transmembranaire qui se lie à l’IGF‑1 et à l’IGF‑2 afin de réguler la détection des facteurs de croissance, la survie cellulaire et l’homéostasie métabolique. L’autophosphorylation dépendante du ligand déclenche le recrutement des protéines adaptatrices IRS et l’activation des voies de signalisation PI3K–AKT–mTOR et RAS–RAF–MEK–ERK, coordonnant la prolifération, la différenciation et la résistance au stress cellulaire. La signalisation via IGF1R s’interface avec les voies du récepteur de l’insuline et module l’apoptose, la progression du cycle cellulaire et la dynamique du cytosquelette. Le dérèglement de cet axe est étudié dans la transformation oncogénique, les mécanismes de résistance aux traitements et les phénotypes métaboliques in vivo, faisant d’Igf1r un nœud fréquent pour la cartographie des voies et la génomique fonctionnelle.

Les particules d'activation lentivirales IGF-1 Receptor α/β/IGF1R (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Igf1r dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales IGF-1 Receptor α/β/IGF1R (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Igf1r, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de IGF-1 Receptor α/β/IGF1R. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Igf1r ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.