IFN-α/βRβ Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421048-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-α/βRβO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IFN-α/βRβ (m) e o Plasmídeo Double Nickase IFN-α/βRβ (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ifnar2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IFN-α/βRβ Anticorpo (F-7): sc-137209
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-α/βRβ Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421048-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ifnar2 codifica a subunidade beta do recetor de interferão alfa/beta (IFN-α/βRβ), um componente central do complexo recetor de interferão do tipo I, necessário para as respostas celulares ao IFN-α e ao IFN-β. A ligação do ligando inicia cascatas de fosforilação dependentes de JAK1/TYK2 que ativam STAT1/STAT2 e IRF9 para formar o ISGF3, promovendo a transcrição de genes estimulados por interferão que regulam a restrição antiviral, a apresentação de antigénios e a programação imunitária inata. A sinalização via IFNAR2 cruza-se com as vias de NF-κB e MAPK, moldando a produção de citocinas e a diferenciação de células imunitárias. A desregulação da sinalização de interferão do tipo I está implicada em fenótipos inflamatórios e autoimunes e influencia as interações entre tumor e sistema imunitário, tornando o Ifnar2 um alvo frequente em estudos mecanísticos de redes de sinalização imunitária.
IFN-α/βRβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ifnar2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ifnar2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ifnar2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ifnar2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.