IFITM1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-416878-LAC

IFITM1 (proteína transmembrana 1 induzida por interferão) é um gene estimulado por interferão que codifica uma pequena proteína associada à membrana, envolvida na defesa antiviral intrínseca. A IFITM1 modula propriedades da membrana celular e o tráfego endossomal para restringir a entrada e a fusão virais, integrando-se na sinalização por interferões do tipo I/II e em vias mais amplas da imunidade inata, como programas transcricionais conduzidos por JAK–STAT. Para além das interações hospedeiro–patógeno, alterações na expressão de IFITM1 têm sido associadas a estados de ativação imunitária e a microambientes inflamatórios, com ligações reportadas à biologia tumoral e ao comportamento metastático em múltiplos contextos de cancro. Estas características tornam a IFITM1 um alvo útil para estudar a responsividade ao interferão, a imunidade intrínseca da célula e a regulação dependente de membrana da captação de agentes patogénicos.

As Partículas de Ativação Lentivirais IFITM1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de IFITM1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais IFITM1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição IFITM1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de IFITM1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo IFITM1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.