IFIT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421035-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFIT1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IFIT1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase IFIT1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ifit1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFIT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFIT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína induzida por interferão com repetições tetratricopeptídicas 1 (IFIT1), codificada pelo gene murino Ifit1, é um efetor-chave estimulado por interferão que restringe a replicação viral ao reconhecer características de RNA não próprio, como RNA com capeamento inadequado ou RNA com 5′-trifosfato, e ao limitar o início da tradução. A IFIT1 atua na sinalização imunitária inata a jusante do interferão do tipo I e de vias de recetores de reconhecimento de padrões, incluindo respostas antivirais mediadas por recetores do tipo RIG-I e por TLR, moldando o panorama transcricional e translacional durante infeção e inflamação. Alterações na expressão de Ifit1 e na atividade da família IFIT têm sido associadas a assinaturas de interferão desreguladas, suscetibilidade do hospedeiro a patógenos virais e patologia mediada pelo sistema imunitário, o que a torna um nó útil para dissecar programas génicos dependentes de interferão em modelos murinos. Os investigadores avaliam frequentemente a IFIT1 em contextos como respostas de stress induzidas por citocinas, ativação de macrófagos e células dendríticas e modulação da apresentação de antigénios e do “cross-talk” entre células imunitárias.
IFIT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ifit1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ifit1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ifit1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ifit1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.