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IFI-16双切口酶质粒(h) | sc-416568-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFI-16双切口酶质粒(h2) | sc-416568-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFI16(IFI-16)是一种可被干扰素诱导的核内 DNA 传感器,能够结合外源或错位的双链 DNA,并促进先天免疫信号传导。它参与 cGAS–STING 轴的激活、与炎性小体相关的反应,以及与细胞周期调控、细胞衰老和 DNA 损伤信号相关的转录调控。IFI-16 会影响抗病毒限制作用,并可调节染色质相关过程,从而塑造细胞因子输出和免疫细胞的激活状态。IFI16 活性失调与异常炎症和自身免疫有关,因此常在病毒感染生物学以及肿瘤免疫微环境调控的研究中被重点关注。
IFI-16 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IFI16 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IFI16内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IFI16的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IFI16基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。