HSP 90α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400088-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSP 90αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSP 90α (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSP 90α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSP90AA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSP 90α Anticorpo (F-2): sc-515081
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSP 90α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400088-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP 90α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400088-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSP90AA1 codifica a chaperona molecular HSP90α, um regulador altamente abundante, dependente de ATP, da proteostase, que apoia o dobramento, a maturação e a estabilização de diversos proteínas cliente, incluindo quinases, receptores nucleares e fatores de transcrição. A HSP90α atua com co-chaperonas na resposta ao choque térmico e se integra a vias que regulam a progressão do ciclo celular, a transdução de sinais, a adaptação ao estresse e o controle de qualidade proteica. Ao amortecer a instabilidade do proteoma, a HSP90α influencia a dinâmica de complexos multiproteicos e o turnover de nós de sinalização. A desregulação da atividade de HSP90AA1/HSP90α tem sido associada a alterações na tolerância ao estresse e à remodelação de redes de sinalização oncogênicas e inflamatórias, tornando-a um alvo frequente em estudos de proteostase e dependência de vias.
HSP 90α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSP90AA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSP90AA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSP90AA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSP90AA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.