Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HRF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402606-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HRFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HRF (h) e o Plasmídeo Double Nickase HRF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TPT1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HRF Anticorpo (B-3): sc-133131
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HRF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HRF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TPT1 humano codifica o fator libertador de histamina (HRF), uma proteína citosólica altamente conservada implicada no crescimento celular, na adaptação ao stress e na sinalização de sobrevivência. O HRF participa em processos ligados ao controlo da tradução e à proteostase, e tem sido associado à modulação da apoptose e às respostas celulares a estímulos oxidativos e inflamatórios. Alterações na expressão de TPT1/HRF foram relatadas em diversos contextos de doença, incluindo biologia do cancro e inflamação mediada pelo sistema imunitário, onde podem correlacionar-se com fenótipos associados à proliferação, migração e citocinas. Estas propriedades tornam o TPT1 um alvo útil para dissecar vias que governam decisões de destino celular, redes de resposta ao stress e sinalização relevante para o sistema imunitário em sistemas modelo humanos.
HRF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TPT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TPT1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TPT1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TPT1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.