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HoxA9慢病毒激活颗粒(h) | sc-401583-LAC | 200 µl | $455.00 |
HOXA9 编码同源盒转录因子 HoxA9,是胚胎前后轴模式建立以及造血干细胞与祖细胞程序的关键调控因子。HoxA9 通过序列特异性的 DNA 结合,并与 PBX、MEIS 等辅因子协同作用,来调控谱系承诺、自我更新与分化,从而塑造影响细胞周期进程与染色质状态的转录网络。HOXA9 的异常表达与髓系分化受阻及致白血病相关的转录调控回路密切相关,因此常与调控 HOX 基因座的上游表观遗传调控因子一并研究。基于这些原因,HOXA9 被广泛用作模型“节点”,用于探究发育基因调控、转录重编程以及致癌通路依赖性等问题。
HoxA9 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 HOXA9 表达。
HoxA9 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在HOXA9转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HoxA9表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 HOXA9 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。