HoxA11 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405264-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HoxA11O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HoxA11 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HoxA11 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HOXA11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HoxA11 Anticorpo (B-11): sc-393440
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HoxA11 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405264-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxA11 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405264-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA11 codifica o fator de transcrição homeobox HoxA11, um regulador de ligação ao DNA que contribui para a padronização ao longo do eixo ântero-posterior e para programas de diferenciação específicos de tecido durante o desenvolvimento. Em contextos adultos, HOXA11 influencia redes transcricionais que coordenam decisões de destino celular, remodelação da matriz extracelular e expressão gênica responsiva a hormônios, particularmente em tecidos mesenquimais e reprodutivos. A desregulação da expressão de HOXA11 ou alterações no seu controle regulatório tem sido associada a anomalias do desenvolvimento e vem sendo investigada em cânceres e distúrbios reprodutivos, nos quais programas transcricionais aberrantes e identidade de linhagem estão implicados. Como regulador transcricional específico de sequência, o HoxA11 é comumente estudado para mapear interações entre enhancers e promotores e definir redes gênicas a jusante que moldam a arquitetura e a função dos tecidos.
HoxA11 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HOXA11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HOXA11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HOXA11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HOXA11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.