hnRNP A2/B1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400635-NIC

HNRNPA2B1 は hnRNP A2/B1 をコードする。hnRNP A2/B1 は豊富に存在する RNA 結合タンパク質で、新生転写産物に結合して pre-mRNA のスプライシング、mRNA の安定化、核—細胞質間輸送を協調的に制御する。さらに、スプライソソーム構成因子や他のリボヌクレオタンパク質（RNP）顆粒因子との相互作用を介して RNA の局在化や翻訳制御にも寄与し、ストレス顆粒のダイナミクスおよび転写後遺伝子制御プログラムと関連づけられている。hnRNP A2/B1 は一部の転写産物に対して m6A の「リーダー」として機能し、分化や細胞ストレス応答を形作る RNA の運命決定に影響を与える。HNRNPA2B1 の機能異常（発現・制御の破綻）は、がん生物学や神経変性に関連する経路における RNA プロセシングネットワークの変化、すなわち異常な RNP のアセンブリやトランスクリプトームのリモデリングと関連していることが報告されている。

hnRNP A2/B1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HNRNPA2B1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HNRNPA2B1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HNRNPA2B1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HNRNPA2B1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。