HNF-1β Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423295-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HNF-1βO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HNF-1β (m) e o Plasmídeo Double Nickase HNF-1β (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hnf1b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HNF-1β Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423295-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HNF-1β Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423295-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Hnf1b** do camundongo codifica o fator nuclear de hepatócitos 1β (HNF-1β), um fator de transcrição contendo homeodomínio que regula a diferenciação epitelial e a morfogênese de órgãos no rim, pâncreas, fígado e trato biliar. O HNF-1β liga-se a elementos promotores e intensificadores (enhancers) para coordenar programas gênicos que determinam a identidade dos segmentos do néfron, o transporte tubular e a polaridade epitelial, integrando-se a redes transcricionais do desenvolvimento durante a ramificação e o padrão de ductos. A atividade desregulada de HNF-1β está associada a anomalias congênitas do rim e do trato urinário, à formação de cistos renais e a defeitos do desenvolvimento pancreático, o que o torna um nó-chave para estudar relações entre genótipo e fenótipo em tecidos epiteliais. Em modelos murinos, a perturbação de **Hnf1b** é amplamente utilizada para investigar o controle transcricional da organogênese, a especificação de linhagens ductais e a regulação de genes metabólicos.
HNF-1β O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hnf1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hnf1b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hnf1b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hnf1b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.