Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Histone H1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404845-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histone H1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histone H1 Double Nickase Plasmid (h) e il Histone H1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HIST1H1B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Histone H1 Antibody (H-2): sc-393358
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histone H1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404845-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone H1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404845-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1B codifica l’istone linker canonico H1.5 (istone H1), una proteina chiave dell’architettura della cromatina che si lega al DNA nucleosomico e promuove la compattazione della cromatina di ordine superiore. Regolando la spaziatura dei nucleosomi e l’accessibilità locale, l’istone H1 influenza i programmi trascrizionali a livello di genoma, la tempistica della replicazione del DNA e la segnalazione del danno al DNA all’interno delle vie associate alla cromatina. Un’alterazione della stechiometria di H1 o delle dinamiche di legame alla cromatina è implicata nella disregolazione epigenetica osservata in diversi tumori e disturbi dello sviluppo, rendendo HIST1H1B un locus utile per studiare il controllo dello stato della cromatina e la stabilità del genoma.
Histone H1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HIST1H1B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HIST1H1B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HIST1H1B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HIST1H1B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.