Histone Deacetylase 10 (HDAC10) Double Nickaseプラスミド (h): sc-403221-NIC

HDAC10はヒストン脱アセチル化酵素10（Histone Deacetylase 10）をコードしており、亜鉛依存性のヒストン脱アセチル化酵素として、ヒストンやその他のタンパク質基質からアセチル基を除去することでクロマチンのアクセス性と転写プログラムを調節します。細胞質での役割が顕著なクラスII脱アセチル化酵素として、HDAC10はオートファジー、DNA損傷応答、細胞ストレス適応の制御に関与することが示されており、増殖や生存を制御する経路に影響を及ぼします。HDAC10の発現や活性の変化は、がん生物学や神経炎症プロセスを含む複数の疾患文脈にわたり観察される、エピジェネティック状態や代謝・免疫関連シグナルネットワークの変化と関連づけられています。これらの機能により、HDAC10はヒト細胞モデルにおける遺伝子発現のエピジェネティック制御と、その下流の表現型を解明するための有用な標的となります。

Histone Deacetylase 10 (HDAC10) ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HDAC10 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HDAC10内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HDAC10の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HDAC10が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。