真核生物遺伝子のコード領域を細菌、昆虫、哺乳動物宿主で発現させるためのプラスミドベクターは一般的に使用されている。このような発現ベクターは、真核生物の標的タンパク質と、標的タンパク質の精製と可視化を助けるためにデザインされた特殊な領域からなるハイブリッド融合タンパク質をコードするために頻繁に使用される。非常に成功していることが証明されているシステムは、コードされたタンパク質のN末端に6つのヒスチジン(His6)配列を挿入することに依存しており、Ni2+キレート樹脂への効率的なカップリングとシングルステップアフィニティークロマトグラフィーによる精製を可能にしている。このポリヒスチジン配列は、トロンビンやエンテロキナーゼのような酵素によって認識される部位で特異的切断によって除去することができ、ポリヒスチジンタグから標的タンパク質を分離することができる。このような融合タンパク質の可視化は、マルチプルクローニング部位の下流にある特異的ペプチド配列に対して作製した抗体を利用することで達成できる。
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His-Tag抗体(His17) 参考文献:
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