HIGD2A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406650-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HIGD2AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HIGD2A (h) e o Plasmídeo Double Nickase HIGD2A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HIGD2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HIGD2A Anticorpo (A-6): sc-390505
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HIGD2A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406650-NIC | 20 µg | $410.00 |
HIGD2A (membro 2A da família de domínios induzíveis por hipóxia) codifica uma pequena proteína da membrana interna mitocondrial que dá suporte à fosforilação oxidativa ao promover a montagem e a estabilidade da citocromo c oxidase (Complexo IV), particularmente por meio da regulação da biogênese do módulo COX3. Ao influenciar a integridade da cadeia de transporte de elétrons, a HIGD2A contribui para a respiração mitocondrial, a manutenção do potencial de membrana e as respostas celulares ao estresse metabólico e à baixa disponibilidade de oxigênio. Espera-se que a perturbação da função de HIGD2A afete a homeostase bioenergética, o manejo de espécies reativas de oxigênio e as vias de controle de qualidade mitocondrial. Esses processos são frequentemente estudados no contexto de disfunção mitocondrial e remodelamento metabólico observados em uma variedade de fenótipos celulares relevantes para doenças.
HIGD2A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HIGD2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HIGD2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HIGD2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HIGD2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.