Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-420882-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Heme Oxygenase 1/HMOX1ダブルニカースプラスミド（m）およびHeme Oxygenase 1/HMOX1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Hmox1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Heme Oxygenase 1/HMOX1 抗体 (F-4): sc-390991
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-420882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Heme Oxygenase 1/HMOX1 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-420882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスのHmox1は、ヘムオキシゲナーゼ1（HMOX1）をコードしている。HMOX1は誘導性でストレス応答性の酵素であり、ヘムを分解してビリベルジン、一酸化炭素、二価鉄を生成することで、ヘム代謝回転をレドックス恒常性と結び付けている。HMOX1は酸化ストレスおよび求電子性ストレス経路によって制御され、とりわけNRF2–KEAP1シグナル伝達を介して調節されるほか、炎症応答やミトコンドリアストレス応答とも統合されている。活性酸素種（ROS）の調節、鉄の取り扱い、細胞保護的な転写プログラムの制御を通じて、HMOX1はマクロファージの極性化、内皮機能、ならびに損傷に対する組織の適応に影響を与える。HMOX1活性の破綻は、炎症、虚血再灌流、代謝機能障害、神経変性、がん生物学の各種モデルと関連付けられており、機構解明研究に有用な標的となっている。
Heme Oxygenase 1/HMOX1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Hmox1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Hmox1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Hmox1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Hmox1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。