Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
HELIC2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-435793-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HELIC2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HELIC2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase HELIC2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Snrnp200. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HELIC2 Anticorpo (G-9): sc-393170
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HELIC2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-435793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HELIC2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-435793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Snrnp200 codifica a proteína HELIC2 de camundongo, uma helicase de RNA essencial da família DExD/H-box no interior da pequena ribonucleoproteína nuclear U5, que dá suporte à ativação do spliceossomo e às etapas catalíticas do splicing do pré‑mRNA. Ao remodelar interações RNA–proteína durante o reconhecimento dos sítios de splicing e a ligação de éxons, a HELIC2 ajuda a manter a fidelidade do transcriptoma, acoplando a dinâmica do splicing a processos mais amplos de processamento de RNA e ao controle da expressão gênica. A desregulação de helicases centrais do spliceossomo pode desencadear alterações generalizadas de splicing alternativo e respostas celulares ao estresse, tornando o Snrnp200 um ponto de partida útil para estudar o metabolismo de RNA e relações genótipo‑fenótipo em sistemas de mamíferos. A investigação funcional da HELIC2 também é relevante para modelar mecanismos pelos quais perturbações do spliceossomo contribuem para erros de splicing associados a doenças e para alterações na proteostase em contextos experimentais.
HELIC2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Snrnp200 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Snrnp200. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Snrnp200. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Snrnp200 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.