HEATR5B Lentiviral Activation Particles (h2): sc-412293-LAC-2

ヒトHEATR5Bは、タンパク質間相互作用を支える足場として機能し、協調的な高分子複合体の組み立てや細胞内構造の形成・維持を担うと考えられるHEATリピート含有タンパク質をコードする。保存されたHEATリピートの生物学的知見に基づけば、HEATR5Bは相互作用パートナーの局在や安定性を調節することで、核細胞質輸送、細胞骨格ダイナミクス、ならびにシグナル伝達や細胞周期に連動した経路の制御といった過程に影響を及ぼすことが予想される。HEATリピート型の足場因子の発現変動や遺伝的変異は、プロテオスタシスの破綻や細胞ストレス応答の異常としばしば関連し、これらは増殖性疾患や神経発達疾患の病態機序とも関係が深い。そのため、HEATR5Bの摂動モデルは、経路間の連結性の解明、相互作用ネットワークのマッピング、ならびにヒト細胞系における下流のトランスクリプトーム変化および表現型への影響評価に有用である。

HEATR5B レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なHEATR5Bの発現上昇を可能にします。

HEATR5B レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、HEATR5B転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性HEATR5Bの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のHEATR5Bゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。