HDC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403606-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HDCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HDC (h) e o Plasmídeo Double Nickase HDC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HDC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HDC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HDC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A histidina descarboxilase (HDC) catalisa a conversão dependente de fosfato de piridoxal da L-histidina em histamina, uma amina bioativa que regula a inflamação, a secreção de ácido gástrico, a neurotransmissão e a permeabilidade vascular. Em tecidos imunitários e de barreira, a produção de histamina impulsionada pela HDC molda as respostas efetoras de mastócitos e basófilos por meio da sinalização de recetores de histamina e de vias GPCR a jusante que modulam a libertação de citocinas e o tráfego de leucócitos. A atividade da HDC também está ligada a programas metabólicos e redox através do turnover de aminas biogénicas e pode influenciar a comunicação célula–célula nos microambientes tecidulares. A expressão desregulada de HDC ou a biossíntese de histamina tem sido associada a inflamação alérgica, perturbações gastrointestinais e processos neuroinflamatórios, tornando a HDC um alvo útil para estudos mecanísticos da sinalização histaminérgica.
HDC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.