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Gβ 1慢病毒激活颗粒(h2) | sc-401901-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人类GNB1基因编码G蛋白β1(Gβ1)亚基,它是异源三聚体G蛋白的核心组成部分,必须与Gγ亚基形成二聚体,从而将被激活的GPCR与下游效应器相耦联。含Gβ1的复合体协调cAMP/PKA、PLCβ–IP3/DAG–PKC以及离子通道调控等通路中的信号传递,进而塑造第二信使动态、膜兴奋性以及受体去敏化/内吞过程。GNB1的遗传与功能扰动与神经递质传递和发育信号的异常有关,并已在神经发育障碍及部分癌症中被报道,支持其作为研究GPCR网络失调的有用靶点。对GNB1进行基因编辑可用于机制性解析Gβγ依赖的信号传导、与GPCR/效应器节点的上位性关系,以及在神经元、心脏和增殖细胞模型中进行表型映射。
Gβ 1 慢病毒激活颗粒(h2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 GNB1 表达。
Gβ 1 慢病毒激活颗粒(h2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在GNB1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Gβ 1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 GNB1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。