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GSK3 beta双切口酶质粒(m) | sc-425249-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Gsk3b 编码糖原合成酶激酶 3β(GSK3β),这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,能够整合并传递调控糖原代谢、细胞周期进程和细胞凋亡的信号。GSK3β 通过依赖磷酸化的方式调控 β-连环蛋白的稳定性,是 Wnt/β-连环蛋白信号通路中的关键枢纽;同时还与 PI3K–AKT、胰岛素信号以及 NF-κB 等炎症相关通路发生交叉作用。通过调节转录因子和细胞骨架调控因子,GSK3β 影响神经元极性、突触可塑性以及分化程序。GSK3β 活性失衡与发育模式异常、代谢功能紊乱、神经退行性表型以及致癌信号环境相关,因此常被用作机制性通路研究的靶点。
GSK3 beta 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Gsk3b 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Gsk3b内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Gsk3b的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Gsk3b基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。